無錫2021年12月1日 /美通社/ -- 肺癌是全球及我國病死率排名第一的惡性腫瘤，約占癌癥死亡人數22%。手術切除是局部非小細胞肺癌（NSCLC）最重要的治療方法，但仍有很多患者在手術后5年內出現局部復發或遠處轉移。目前，NSCLC患者的預后分層主要基于臨床病理學參數，例如TNM分期、氣道播散和病理亞型等。NCCN指南推薦II-IIIA期和高風險IB期NSCLC患者在根治手術后接受輔助化療，但輔助化療僅使5年總體生存率改善了5%。因此，迫切需要更有效的方法識別有復發高風險的患者和有可能從輔助治療獲益的患者。近年來，已有一些研究報道，基于循環腫瘤DNA（ctDNA）測序可應用于分子殘留病灶（molecular residual disease，MRD）檢測，可輔助識別術后復發高風險的患者。但目前關于NSCLC患者術后MRD還缺少大樣本多中心前瞻性研究數據，驗證ctDNA是否可作為NSCLC患者圍術期MRD檢測和預測NSCLC患者術后復發的標志物。
2021年11月，Clinical Cancer Research雜志（中科院1區TOP期刊，IF= 12.531）發表了由四川大學華西醫院劉倫旭教授團隊聯合四川省人民醫院、成都上錦南府醫院、無錫臻和生物科技有限公司（以下簡稱“臻和科技”）合作的研究成果“Perioperative ctDNA-based Molecular Residual Disease Detection for Non-Small Cell Lung Cancer: A Prospective Multicenter Cohort Study (LUNGCA-1)”。
LUNGCA研究是劉倫旭教授團隊牽頭發起的大規模多中心前瞻性肺癌預后分子標志物的研究。本次發表的文章是其中的LUNGCA-1隊列的分析成果，揭示了圍術期ctDNA能有效預測NSCLC患者術后復發，可作為NSCLC患者術后早期檢測MRD的可靠指標。
研究亮點
研究設計
本研究納入2017年9月至2020年5月入組LUNGCA隊列中的330例I-III期NSCLC患者，采用臻和科技的769 基因NGS panel（產品：百適博®），檢測這些患者的腫瘤組織標本（n=330）和圍術期（術前、術后3天和術后1個月）血漿標本（n=950）。采用組織先驗的策略，輔助以臻和科技的MRD-MinverVa算法判斷ctDNA是否陽性。主要研究指標是圍術期ctDNA陽性狀態及患者無復發生存期（relapse free survival，RFS）。
研究結果
1、NSCLC患者特征與圍術期ctDNA狀態
入組患者I期占67.0%，肺腺癌占84.8%，中位隨訪時間1,068天（范圍：341-1,340天），21.2%的患者出現局部復發或遠處轉移。在腫瘤組織中檢測到的主要突變類型是點突變占90.28%，CNV和融合占比較低為9.72%，腫瘤組織和血漿ctDNA中突變頻率最高的驅動基因為TP53 和EGFR，其他高頻突變基因包括KMT2D、 CDKN2A、PTEN、PIK3CA等（圖1）。腫瘤直徑大于3cm、病理分期為II期和III期NSCLC、肺鱗狀細胞癌（LUSC）患者更傾向于術前血漿ctDNA陽性。在所有三個圍術期時間點，僅病理分期與ctDNA狀態顯著相關。
圖1. 患者特征、腫瘤組織中的體細胞突變和圍手術期ctDNA檢測狀況 （A）腫瘤組織中的體細胞突變數。（B）腫瘤組織中頻繁突變的驅動基因。（C）患者的復發情況。（D）患者的臨床病理特征。（E）術前、術后3天和術后1個月檢測ctDNA狀態。
2、術前ctDNA狀態和NSCLC預后之間的相關性
術前ctDNA陽性患者中46.4%（32/69）出現術后復發，而陰性患者中僅14.6%（38/261）術后復發（P<0.001）（圖2 A）。術前ctDNA陽性患者的RFS顯著低于ctDNA陰性患者（HR 4.2；95%CI, 2.6-6.7; P<0.001）（圖2 B）。術前ctDNA狀態是RFS的獨立風險因素（HR 2.6，95%CI 1.3-5.1；P=0.005）。
圖2. NSCLC患者術前ctDNA的預后價值 （A）比較術前ctDNA陰性患者和術前ctDNA陽性患者的總復發率。 （B）Kaplan-Meier曲線展示根據術前ctDNA狀態分層的RFS。
3、術后ctDNA作為MRD檢測和復發預測的標志物
術后一個月內ctDNA-MRD陽性患者的復發率80.8%（21/26），顯著高于陰性患者16.2%（49/303）（P<0.001）（圖3 C）。術后ctDNA-MRD狀態是術后患者復發預測的顯著指標（HR, 11.1；95%CI, 6.5-19.0； P < 0.001）（圖3 D）。多因素Cox分析顯示術后ctDNA-MRD陽性是患者RFS縮短的獨立危險因素（P < 0.001）。并且ctDNA-MRD狀態在多因素Cox分析中對RFS預測的相對貢獻度高于TNM分期等臨床變量的總和（圖3 E）。
| 注：術后ctDNA-MRD陽性指患者術后3天和/或1個月血漿檢測到ctDNA；術后ctDNA-MRD陰性指患者術后3天和1個月血漿均未檢測到ctDNA。 |
圖3. NSCLC患者圍手術期ctDNA的預后價值 （C）比較基于ctDNA的MRD陰性患者和MRD陽性患者的總復發率。（D）Kaplan-Meier曲線顯示根據基于ctDNA的MRD狀態分層的RFS。（E）多因素Cox分析，臨床病理變量（左）和臨床病理變量加上基于ctDNA的MRD（右）的每個參數對RFS預測的相對貢獻。
4、基于ctDNA的MRD與輔助治療結果之間的相關性
26名術后一個月內ctDNA-MRD陽性患者中，9名未接受輔助治療的患者全部復發；17名接受了輔助治療，其中5名未復發（圖4 A）。單因素分析發現MRD陽性患者接受輔助治療可提高RFS （HR, 0.3; 95%CI, 0.1-0.8；P = 0.008）；MRD陰性患者接受輔助治療，RFS 反而更差 （HR, 3.1; 95%CI, 1.7-5.5；P < 0.001）（圖4 B）。 納入臨床分期等多因素分析發現，MRD陽性患者，輔助治療與患者RFS顯著相關；MRD陰性患者，輔助治療與患者RFS無顯著相關性。
圖4. MRD陽性和MRD陰性患者RFS和輔助治療的相關性 （A）接受輔助治療和未接受輔助治療的MRD陽性患者總復發率比較（左）；接受輔助治療和未接受輔助治療的MRD陰性患者總復發率的比較（右）。 （B）Kaplan-Meier分析比較MRD陽性患者接受輔助治療（深紅線）和未接受輔助治療（淺紅線）的RFS，以及比較MRD陰性患者接受輔助治療（深藍線）和未接受輔助治療（淺藍線）的RFS。
研究結論
這項大規模前瞻性、多中心NSCLC隊列研究證明圍術期ctDNA可有效檢測MRD并識別高復發患者，ctDNA-MRD檢測可為肺癌術后治療決策提供重要參考，在患者術后管理中有巨大的臨床應用價值。
